AEEA-Гидрофильный линкер AEEA

Агрегация ADC и быстрый клиренс являются основными препятствиями, ведущими к высокой иммуногенности, низкой эффективности и неудаче серии. Введение гидрофильных линкеров (содержащих звенья ПЭГ, таких как AEEA-AEEA) является эффективной стратегией решения этих двух проблем.
The mechanism for reducing aggregation: The driving force for ADC aggregation is mainly the mutual attraction between hydrophobic drug molecules. When DAR>4, multiple drug molecules concentrate on the surface of the antibody, forming a "hydrophobic plaque". Hydrophilic PEG linkers, such as AEEA-AEEA, prevent aggregation through the following methods: ① Hydration layer repulsion: PEG chains bind a large number of water molecules, and each EO unit binds 2-3 H ₂ O, forming a hydration layer with a thickness of about 0.5-1 nm/unit. The total thickness of the hydration layer contributed by two AEEA units (four EO) is about 2 nm, which is sufficient to form an effective barrier between drug molecules (repulsive energy~3-5 kT, far greater than hydrophobic attraction~1-2 kT). ② Conformal entropy repulsion: The flexible conformation of PEG chains reduces their entropy during compression, generating entropy elastic repulsion and further resisting aggregation. The experiment showed that using AEEA-AEEA ADC (DAR=6) at a concentration of 5 mg/mL, the aggregation rate (SEC-HPLC detection of HMW aggregates) was less than 3%; The control without PEG linker (DAR=4) had aggregates>15%.
Механизм задержки клиренса: рецепторы клиренса на клетках Купфера и синусоидальных эндотелиальных клетках печени, такие как рецептор-поглотитель SR-B1 и специфические домены антитела, распознающего маннозный рецептор MR. Гидрофобная нагрузка лекарственным средством на поверхности антител обнажает гидрофобные области, повышая сродство к очистке рецепторов. Гидрофильные цепи ПЭГ AEEA-AEEA могут эффективно «маскировать» эти гидрофобные области. Исследования показали, что ADC с использованием линкеров ПЭГ снижает поглощение печенью на 50-60% по сравнению с контрольной группой без ПЭГ, а скорость клиренса из плазмы снижается с 12 мл/ч/кг до 6 мл/ч/кг. Период полувыведения цикла был увеличен с 3 до 7 дней на мышиной модели. Кроме того, гидрофильность также снижает риск связывания с антителами против ПЭГ. Когда длина ПЭГ умеренная, иммуногенность димера AEEA намного ниже, чем у длинноцепочечного ПЭГ, такого как ПЭГ2000.
Синергия формул: гидрофильные линкеры также упрощают разработку рецептур, - сохраняя стабильность без необходимости использования высоких концентраций поверхностно-активных веществ. В лиофилизированных составах агрегация ADC, содержащих AEEA-AEEA, после восстановления составляет менее 1 %, что значительно превышает фармакопейный стандарт (<5%). Therefore, hydrophilic PEG linkers have become a "standard" design element for ADC stability and long cycling.